【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：麻疹病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

【包裝規(guī)格】

96人份/盒

【預(yù)期用途】

本產(chǎn)品用于體外定性檢測人血清、血漿或全血樣本中的麻疹病毒IgG抗體滴度是否達(dá)到200 mIU/ml。

適用于麻疹病毒感染的輔助診斷、體外檢測人體內(nèi)抗麻疹病毒IgG抗體滴度是否達(dá)到200mIU/ml。

麻疹病毒是一種球形、非節(jié)段的、單股負(fù)鏈RNA病毒，直徑為120～125nm，在病毒學(xué)上屬副粘病毒科麻疹病毒屬。麻疹病毒主要通過呼吸道飛沫實(shí)現(xiàn)人與人的傳播，此外還可以氣溶膠的形式通過空氣傳播。病毒在前驅(qū)期的傳染性最強(qiáng)，在易感家庭（和機(jī)構(gòu)）人群中的二代發(fā)病率較高，可達(dá)到90%甚至以上。由于病例在出診前、后均可排毒，平均在家庭內(nèi)首發(fā)病例出診后的14～15天，繼發(fā)病例即可出現(xiàn)皮疹。幾乎所有原發(fā)病例（除體內(nèi)仍有母傳抗體或注射了免疫球蛋白的病例外）均呈顯性感染。目前尚無證據(jù)表明免疫人群暴露后可不出現(xiàn)癥狀但傳播病毒。

臨床表現(xiàn)為呼吸道暴露后，經(jīng)過10～12天的潛伏期，前期的臨床癥狀開始出現(xiàn)。如果皮膚或黏膜破損后發(fā)生暴露，潛伏期可縮短至2～4天；免疫功能抑制的患者潛伏期可能會延長。前驅(qū)期主要表現(xiàn)為發(fā)熱、全身乏力、結(jié)膜炎、鼻炎和支氣管炎（如咳嗽），可持續(xù)2～4天，這些癥狀與一般的上呼吸道感染類似。隨后4天內(nèi)，體溫明顯上升，可達(dá)到40.6℃。柯氏斑被認(rèn)為是麻疹特有的一種黏膜疹，出現(xiàn)于皮疹前1～2天的頰粘膜處，也可持續(xù)至疹后1～2天。病毒暴露14天后，病例出現(xiàn)紅斑丘疹，從頭部（臉、前額、發(fā)線、耳后和上頸部）經(jīng)軀干至四肢，約需3～4天。皮疹通常集中于面部和軀體上半部，壓之褪色。隨后3～4天，皮疹按照出診順序開始消退，并遺留淺褐色色素沉著。

在自然感染麻疹病毒后，人體可出現(xiàn)長期（可能是終生）的免疫記憶，其中包括不斷產(chǎn)生麻疹病毒特異性抗體和循環(huán)系統(tǒng)中的麻疹病毒特異性CD4+和CD8+ T淋巴細(xì)胞。麻疹疫苗可誘導(dǎo)與自然感染相當(dāng)?shù)捏w液免疫和細(xì)胞免疫，不過抗體滴度通常較低。 此外，與自然感染過麻疹的產(chǎn)婦相比，接種麻疹疫苗的產(chǎn)婦所生嬰兒體內(nèi)的母傳抗體平均濃度也較低。接種麻疹疫苗后， 血液中可出現(xiàn)一過性的、麻疹特異性免疫球蛋白IgM 抗體，而粘膜分泌液中則出現(xiàn) IgA 抗體；IgG抗體可在血液中持續(xù)存在多年，同時(shí)，世界衛(wèi)生組織（WHO）在“免疫接種系列之免疫學(xué)基礎(chǔ)（第七部分：麻疹）”中表示，使用NIBSC第二代國際標(biāo)準(zhǔn)品（NIBSC code：66/202）進(jìn)行溯源，人體內(nèi)抗麻疹病毒IgG抗體最低保護(hù)水平為200mIU/ml。

目前檢測麻疹病毒特異性的IgG抗體的主要方法有：血凝抑制試驗(yàn)（HI）、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CF）、蝕斑減少中和試驗(yàn)（PRNT）、微量細(xì)胞病變抑制試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等。

【檢驗(yàn)原理】

試劑盒采用酶聯(lián)免疫間接法原理。

本試劑盒系用滅活純化麻疹病毒抗原包被微孔板。樣品加入微孔后，其中抗麻疹病毒抗體與微孔中固相化麻疹病毒抗原形成抗原-抗體免疫復(fù)合物，洗滌去除未結(jié)合物，加入辣根過氧化酶標(biāo)記小鼠抗人IgG單克隆抗體，與復(fù)合物反應(yīng)形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物，洗滌去除未參與反應(yīng)的酶結(jié)合物，加TMB底物顯色，呈色的深淺與麻疹病毒IgG抗體的含量成正比。

【主要組成成分】

【儲存條件及有效期】

1. 于2~8℃冷藏、避光保存，禁止冷凍，有效期為12個月。

2. 未用完的預(yù)包被板應(yīng)立即與干燥劑一起放入自封袋中密封，2~8℃環(huán)境中保存時(shí)間不得超過一周。

3. 未用完的其他組分試劑應(yīng)立即將瓶蓋蓋好，置于2~8℃環(huán)境中保存，保存時(shí)間不得超過一周。

4. 產(chǎn)品的生產(chǎn)日期及有效期至詳見產(chǎn)品標(biāo)簽。

【適用儀器】

含450nm波長的酶標(biāo)儀或全自動酶免分析儀。

【樣本要求】

1. 人血清/血漿或全血均可用作測定樣本。抗凝劑（肝素、EDTA、檸檬酸鈉）對樣本檢測結(jié)果無干擾。

2. 血清/血漿樣品2～8℃冷藏保存可穩(wěn)定4天，但建議在72小時(shí)內(nèi)使用；全血樣本即采即用；若需長期保存，血清/血漿樣品可直接-20℃冷凍保存可穩(wěn)定一年，全血樣本可用樣品稀釋液稀釋后吸出上清液，-20℃冷凍保存可穩(wěn)定一年。凍存的樣本凍融次數(shù)建議不超過3次。

3. 應(yīng)避免使用溶血、脂血樣本，不能使用被污染的樣本。

【檢驗(yàn)方法】

1. 樣品準(zhǔn)備

1.1 先向1.5ml離心管中加入樣品稀釋液500μl。編號。

1.2 采集全血10μl，或吸取血清/血漿5μl，加入相應(yīng)的離心管中，立即輕搖、混勻。

1.3 若為全血樣品，將離心管置室溫（或4℃冰箱）靜置，待紅血球全部沉降到孔底，取上清液檢測；若為血清或血漿樣品，混勻后即可使用。

2. 將試劑盒和樣品從冷藏環(huán)境中取出，放置30分鐘，平衡至室溫；恒溫箱或水浴鍋調(diào)節(jié)至37±1℃。

3. 配制洗滌液：1倍體積的濃縮洗滌液加入19倍體積的蒸餾水、純化水或去離子水，混勻。

4. 加樣：每次試驗(yàn)設(shè)陽性對照1孔、陰性對照1孔，每孔加入相應(yīng)的對照液100μl；設(shè)空白對照1孔，加樣品稀釋液100μl；其余每孔加入已稀釋的樣品（全血樣品取上清液）100μl。貼上封口膜，置37℃溫育60分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復(fù)5次。有條件的可按上述洗滌條件設(shè)置參數(shù)，用洗板機(jī)洗滌。

5. 加抗人IgG抗體酶標(biāo)記物：每孔100μl（空白孔不加）。貼上封口膜，置37℃溫育30分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復(fù)5次。

6. 顯色：每孔加底物液A及底物液B各50μl，混勻。貼上封口膜，置37℃避光顯色15分鐘。

7. 測定：小心將封口膜揭掉，每孔加終止液50μl，混勻。30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀雙波長450nm/630nm測定各孔OD值(使用單波長450nm時(shí)，必須以空白孔調(diào)零）。

【陽性判斷值】

1. 陰性對照OD₄₅₀＜0.3，陽性對照OD₄₅₀≥0.6，試驗(yàn)成立。

2. Cut-Off 值 = 陰性對照OD₄₅₀值 × 2.1，S/CO值 =

0.9≤S/CO值＜1.1，判為可疑，建議重復(fù)檢測；

S/CO值≥1.1，判為陽性；

S/CO值＜0.9，判為陰性。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

1. 陽性結(jié)果：S/CO值≥1.1，表示樣本中麻疹病毒IgG抗體滴度不低于200mIU/ml。

2. 陰性結(jié)果：S/CO值＜0.9，表示樣本中麻疹病毒IgG抗體滴度低于200mIU/ml。

3. 可疑結(jié)果：0.9≤S/CO值＜1.1，表示樣本中麻疹病毒IgG抗體為處于臨界值，建議重復(fù)檢測或兩周后再次檢測，動態(tài)觀察抗體水平的變化。

【檢驗(yàn)方法的局限性】

僅用于麻疹病毒感染的輔助診斷及麻疹病毒IgG抗體的定性檢測。