甲型肝炎病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：國(guó)械注準(zhǔn)20193401865
產(chǎn)品說明：本產(chǎn)品用于體外定性檢測(cè)人血清/血漿或全血樣本中的甲型肝炎病毒IgG抗體。
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：甲型肝炎病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
【包裝規(guī)格】
96人份/盒
【預(yù)期用途】
本產(chǎn)品用于體外定性檢測(cè)人血清/血漿或全血樣本中的甲型肝炎病毒IgG抗體。
適用于甲型肝炎病毒感染的輔助診斷、甲型肝炎疫苗接種后及正?；蛞赘腥巳嚎辜仔透窝撞《?/span>IgG抗體檢測(cè)。
【檢驗(yàn)原理】
試劑盒采用酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)抑制法原理。本試劑盒系用滅活純化甲型肝炎病毒抗原固定于微孔板。樣品加入微孔后，其中抗甲型肝炎病毒IgG抗體與微孔中固相化甲型肝炎病毒抗原形成抗原-抗體免疫復(fù)合物，洗滌去除未結(jié)合物，加入辣根過氧化酶標(biāo)記的小鼠抗甲型肝炎病毒IgG單克隆抗體，洗滌去除未參與反應(yīng)的酶結(jié)合物，加TMB底物顯色，呈色的深淺與甲型肝炎病毒抗體的含量成反比。
【主要組成成份】
序號(hào) |
組份名稱 |
規(guī)格與數(shù)量 |
組份主要成分 |
1 |
預(yù)包被板 |
12T×8 |
滅活純化的甲型肝炎病毒抗原 |
2 |
小鼠抗甲型肝炎病毒IgG單克隆抗體酶標(biāo)記物 |
10ml×1瓶 |
辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗甲型肝炎病毒IgG單克隆抗體，含穩(wěn)定劑、生物防腐劑 |
3 |
濃縮洗滌液（20×） |
30ml×1瓶 |
20倍濃縮磷酸緩沖液，含NaCl、吐溫-20 |
4 |
樣品稀釋液 |
50ml×1瓶 |
緩沖液、穩(wěn)定劑等 |
5 |
陰性對(duì)照品 |
0.5ml×1瓶 |
滅活人源抗甲型肝炎病毒IgG抗體陰性血清，穩(wěn)定劑 |
6 |
陽(yáng)性對(duì)照品 |
0.5ml×1瓶 |
滅活人源抗甲型肝炎病毒IgG抗體陽(yáng)性血清，穩(wěn)定劑 |
7 |
底物液A |
5.0ml×1瓶 |
主要成分為過氧化脲 |
8 |
底物液B |
5.0ml×1瓶 |
主要成分為TMB |
9 |
終止液 |
5.0ml×1瓶 |
0.5M H2SO4溶液 |
10 |
自封袋 |
1份 |
―― |
11 |
封口膜 |
3張 |
―― |
【儲(chǔ)存條件及有效期】
1. 于2~8℃冷藏、避光保存，禁止冷凍，有效期為12個(gè)月。
2. 未用完的板條應(yīng)立即放于密封袋中封存。開封過的試劑盒應(yīng)在一周內(nèi)用完。
3. 生產(chǎn)日期及失效期等見標(biāo)簽。
【適用儀器】
含450nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀或全自動(dòng)酶免分析儀。
【樣品要求】
1. 人血清/血漿或全血均可用作測(cè)定樣本。抗凝劑（肝素、EDTA、檸檬酸鈉）對(duì)樣本檢測(cè)結(jié)果無干擾。
2. 血清/血漿樣品2～8℃冷藏保存可穩(wěn)定一周，但建議在72小時(shí)內(nèi)使用；全血樣本即采即用；若需長(zhǎng)期保存，血清/血漿樣品可直接-20℃冷凍保存可穩(wěn)定一年，全血樣本可用樣品稀釋液稀釋后吸出上清液，-20℃冷凍保存可穩(wěn)定一年。凍存的樣本凍融次數(shù)建議不超過3次。
3. 應(yīng)避免使用溶血、脂血樣本，不能使用被污染的樣本。
【檢驗(yàn)方法】
1. 樣品準(zhǔn)備
1.1 先向1.5ml離心管中加入樣品稀釋液500μl。編號(hào)。
1.2 采集全血10μl，或吸取血清/血漿5μl，加入相應(yīng)的離心管中，立即輕搖、混勻。
1.3若為全血樣品，將離心管室溫（或2～8℃冰箱）靜置，待紅血球全部沉降到孔底，取上清液檢測(cè)；若為血清或血漿樣品，混勻后即可使用。
2. 將試劑盒和樣品從冷藏環(huán)境中取出，放置30分鐘，平衡至室溫；恒溫箱或水浴鍋調(diào)節(jié)至37±1℃。
3. 配制洗滌液：1倍體積的濃縮洗滌液加入19倍體積的蒸餾水、純化水或去離子水，混勻。
4. 加樣：每次試驗(yàn)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照1孔、陰性對(duì)照1孔，每孔加入相應(yīng)的對(duì)照液100μl；設(shè)空白對(duì)照1孔，加樣品稀釋液100μl；其余每孔加入已稀釋的樣品 100μl。貼上封口膜，置37℃溫育30分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。拍干。
5. 加甲型肝炎病毒抗體酶標(biāo)記物：每孔100μl（空白孔不加）。貼上封口膜，置37℃溫育30分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復(fù)5次。有條件的可按上述洗滌條件設(shè)置參數(shù)，用洗板機(jī)洗滌。
6. 顯色：每孔加底物液A及底物液B各50μl，混勻。貼上封口膜，置37℃避光顯色15分鐘。
7. 測(cè)定：小心將封口膜揭掉，每孔加終止液50μl，混勻。30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀雙波長(zhǎng)450nm/630nm測(cè)定各孔OD值(使用單波長(zhǎng)450nm時(shí)，必須以空白孔調(diào)零）。
【陽(yáng)性判斷值】
1.陽(yáng)性對(duì)照OD450＜0.3；陰性對(duì)照OD450≥0.6，試驗(yàn)成立。
2. 參考值以陰性對(duì)照OD450值為依據(jù)。
樣品孔OD450值≤陰性對(duì)照OD450×0.6，判為陽(yáng)性。
樣品孔OD450值＞陰性對(duì)照OD450×0.6，判為陰性。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 陽(yáng)性結(jié)果：提示甲型肝炎病毒既往感染或接種過甲型肝炎疫苗已產(chǎn)生甲型肝炎病毒抗體。
2. 陰性結(jié)果：提示無甲型肝炎病毒既往感染或未接種過甲型肝炎疫苗或甲型肝炎疫苗接種不成功。
3. 可疑結(jié)果：建議重復(fù)檢測(cè)或兩周后再次檢測(cè)，動(dòng)態(tài)觀察抗體水平的變化。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
僅用于甲型肝炎病毒感染的輔助診斷及抗甲型肝炎病毒IgG抗體的定性檢測(cè)。